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Guia de Prueba PCR, Tipos de PCR.

Publicado por Agustin De la Peña | 27.02.2021 | Actualidad de Enfermeria

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¿Qué es una PCR?

La PCR, siglas en inglés de ‘Reacción en Cadena de la Polimerasa’, es una prueba de diagnóstico que permite detectar un fragmento del material genético de un agente infeccioso como el Covid 19.

Tiene una característica básica: detecta la presencia del virus en las primeras fases de la infección y en las posteriores.

Su alto grado de eficacia , hace que sea la única prueba reconocida por la mayoría de compañías aéreas y países para poder volar como pasajero en un avión.

¿Cuál es la prueba más utilizada para diagnosticar Bien la COVID-19?

La prueba que más se utiliza para la detección del coronavirus y así poder diagnosticar la enfermedad COVID-19, es la PCR. Concretamente la RT-PCR, «reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa».

Esta es la prueba diagnóstica de referencia para el diagnóstico del virus en TODAS las fases de la enfermedad.

¿Qué se busca al realizar una PCR?

Lo que permiten las pruebas PCR es detectar un fragmento de material genético exclusivo del SARS-CoV-2, el coronavirus que causa la COVID-19.

¿Para qué sirve una RT-PCR?

La PCR sirve para indicar la presencia del virus en el organismo, por lo que es muy útil para saber si alguien se ha contagiado, para estudiar la transmisión del virus y rastrear los casos.

¿Me puedo realizar una PCR yo mismo?

Aunque es difícil, técnicamente seria posible ( se esta promoviendo esta idea en los Test de Antigenos ).

PERO la Pcr en el momento actual necesita ser verificada por un laboratorio que analiza la muestra y también es imprescindible una persona que extrae la muestra,  este papel extractor lo desempeñan las enfermeras de cada país.

La PCR es una prueba que presenta un grado de complejidad, por lo que necesita personal entrenado y preparado para su realización.

En el Caso de la PCR de Saliva

¿Cómo funciona la RT- PCR?

El procedimiento comienza con la extracción de una muestra de la mucosa nasofaríngea del cliente, que es donde se concentra la mayor carga viral del covid 19.

En el interior del coronavirus se encuentra el material genético del virus en forma de ARN, que fue descubierto y secuenciado al inicio de la pandemia.

La técnica RT-PCR consiste en localizar una secuencia concreta del material genético del virus y hacer copias de ella, lo que sirve como método de detección.

“El ADN constituye nuestro material genético, pero SARS-CoV-2 no contiene ADN, sino ARN. Como las pruebas de PCR solo pueden hacer copias de ADN, primero hay que convertir el ARN en ADN”.

La técnica PCR convencional sirve para detectar ADN, no ARN.

Para transformar el ARN en ADN se usa una enzima llamada polimerasa transcriptasa inversa.

Este paso se denomina RT por retrotranscripción, por eso la técnica que se está utilizando se llama RT-PCR.

Además de polimerasa se usan otras moléculas llamadas cebadores, cuyo papel es indicar a la polimerasa en qué parte del ADN debe empezar la duplicación.

“Los cebadores son capaces de señalar fragmentos exclusivos del material genético del virus, de modo que la reacción de la polimerasa solo duplicará las secuencias de ADN si los cebadores las localizan”.

El proceso de la PCR se ha automatizado en unas máquinas llamadas termocicladores.

Se introduce la muestra junto a las polimerasas y los cebadores en un tubo de ensayo. El termociclador funciona con ciclos de temperatura, calentando y enfriando la muestra.

El calor permite al cebador unirse al ADN, y a medida que se enfría, indicar a la polimerasa dónde debe comenzar a duplicar.

Este proceso explica cómo la RT-PCR amplifica el código genético del virus, pero no cómo se detecta.

“Este proceso continúa a través de repetidos calentamientos y enfriamientos hasta que se han creado millones de copias del ADN”.

Para detectar su presencia es donde entran los colorantes fluorescentes añadidos al tubo de ensayo mientras se copia el ADN. Se unen al ADN copiado, lo que aumenta su fluorescencia haciendo que emitan más luz permitiendo confirmar la presencia del virus.

La fluorescencia aumenta a medida que se producen más copias y, si alcanza un cierto umbral, la prueba es positiva.

“Si el virus no estaba presente en la muestra, la prueba RT- PCR no habrá hecho copias, por lo que el umbral de fluorescencia no se alcanzará y, en ese caso, la prueba será negativa.

¿Qué son falsos positivos?

La secuencia del material genetico del SARS-CoV-2 que se usa en la PCR es exclusiva de este coronavirus; no se encuentra en otros virus, así que es prácticamente imposible que un virus diferente dé un falso positivo.

Los falsos positivos que se han producido con esta prueba pueden deberse a una mala toma de muestra o a contaminaciones cruzadas con otras muestras.

¿Qué son falsos negativos?

Aunque la sensibilidad de la PCR es elevada, pueden darse casos de falsos negativos. La mayoría se debe a que la técnica no es capaz de detectar el coronavirus cuando la carga viral es muy baja.

Esto sucede al inicio del contagio, cuando el virus todavía no se ha replicado lo suficiente en el organismo como para ser detectado.

“Por eso, aunque hayamos tenido un contacto de riesgo, lo mejor es esperar unos días para realizarse una prueba PCR”.

La posibilidad de un falso negativo es la razón por la que, aunque el resultado de la PCR sea negativo, se aconseja mantenerse aislado al menos 10 días cuando se ha tenido un contacto de riesgo (15 minutos a menos de dos metros con una persona infectada).

¿Un resultado negativo en PCR significa que no estoy infectado?

No.

Un resultado NEGATIVO no significa que no haya presencia del virus, sino que podemos encontramos en un momento del proceso de infección en qué la carga viral (es decir, la cantidad de virus que hay en nuestro organismo) de la muestra es insuficiente para detectarlo.

Por eso si la persona presenta síntomas claros de la enfermedad, deberá repetirse la prueba pasados unas 48 horas.

¿Una PCR me da información sobre la evolución de la infección por coronavirus?

No.

Apenas ofrece información sobre el estado de la infección. Por eso es habitual combinar la PCR con otros test.

Los test serológicos o de anticuerpos sirven para determinar si el sistema inmunitario se ha defendido del coronavirus en el pasado o se está defendiendo en el momento actual, es decir, aporta información sobre cómo evoluciona la enfermedad.

Test de antígeno y test de anticuerpo. ¿Es lo mismo que PCR?

No.

A diferencia de la PCR, estos test rápidos no identifican el ARN del virus, sino que detectan, o bien anticuerpos producidos frente al virus utilizando una muestra de sangre (Test rápido de anticuerpos), o bien proteínas del virus presente en las muestras respiratorias de exudado nasofaríngeo. (Test rápido de antígeno)

¿Puedo estar infectado y no tener síntomas?

Sí.

Durante los primeros cinco-7 días días de la enfermedad COVID-19 los pacientes pueden ser asintomáticos, sin haber desarrollado anticuerpos (test rápido negativo) y, sin embargo, contar con una alta carga viral (PCR positiva) siendo portadores del virus y contagioso.

En la persona infectada de modo asintomático el virus se comporta de un modo benigno.

Sin embargo, para la población general, significa un peligro de expansión del virus.

La PCR del material genético del virus es un sistema que tenemos actualmente para identificar, en un momento dado, la presencia de la infección.

Por tanto, esta prueba diagnóstica informa de si la persona, aunque sea asintomática, puede ser contagiosa.

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Sobre Agustin De la Peña

Agustin De la Peña, es Enfermero de Madrid, Especialista en Enfermeria Pediatrica y Experto en Enfermeria Deportiva. Es Enfermero Sección Futbol Base del Real Madrid C.F

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